問題七、為什么要血清熱滅活。
加熱可以滅活補體系統。啟動的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化。在免疫學研究、培養ES 細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。
問題八、有必要對血清都進行熱滅活嗎。
實驗顯示,熱滅活血清對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物會顯著地增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。 因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱滅活處理這一步。如此一來,不但節省您寶貴的時間,更確保血清的質量!
問題九、如何正確進行血清滅活。
熱滅活時請將血清置于 56℃水浴30 分鐘。為盡量減少熱滅活對血清品質的影響,一次滅活的血清體積不宜過大。最好準備同樣的容器裝相等體積的水(與血清相同溫度),滅活時將裝有血清和水的容器同時放入56℃水浴, 在裝水的容器中放置溫度計,加熱過程中不時輕輕旋轉混勻血清,當溫度計顯示達到56℃左右,開始計時。